Экстракт листьев Engelhardia Roxburghiana DHQпроизводитель
Экстракт листьев Engelhardia Roxburghiana, дигидрокверцетинпредставляет собой соединение дигидрофлавонола, содержащееся во многих растениях. Помимо синтетического дигидрокверцетина, представленного на рынке, основным природным источником является лиственница. В ходе исследований листьев Astragalus membranaceus наша компания обнаружила, что натуральные листья Astragalus membranaceus также содержат дигидрокверцетин. Поскольку ресурсы лиственницы становятся все более ограниченными, открытие нашей компании может значительно снизить себестоимость производства дигидрокверцетина и обеспечить наиболее экономически выгодную продукцию из дигидрокверцетина на рынке.
Будучи крупнейшим производителем дигидрокверцетина в Китае, KINTAI имеет два основных технологических направления получения дигидрокверцетина: биосинтез и экстракцию. Дигидрокверцетин, который мы в настоящее время производим, в основном добывается из лиственницы, а некоторые — из листьев лайчи. Биосинтез скоро вступит в опытно-промышленное производство, и после его завершения вы получите высококачественные и недорогие продукты дигидрокверцетина. Ниже мы в основном представляем текущий процесс экстракции нашей компании с использованием листьев лайчи и метод синтеза биосинтеза. Если вас интересует более подробная информация, пожалуйста, свяжитесь с нами для получения более профессиональных ответов.
КИНТАЙ Процесс экстракции дигидрокверцетина из листьев желтой лайчи
В нашем производстве применяется многоэтапный процесс, гарантирующий чистоту и высокое качество продукции.Экстракт листьев Engelhardia Roxburghiana DHQ.
Обработка сырья: выберите свежие листья желтой лайчи, удалите примеси и нарежьте их, чтобы активные ингредиенты полностью высвободились в последующем процессе экстракции.
Экстракция и концентрация:Используйте 80% раствор этанола для двух рефлюксных экстракций. Добавьте в 6 раз больше этанола в первый раз и в 5 раз больше этанола во второй раз, чтобы обеспечить эффективную экстракцию активных ингредиентов из листьев желтой лайчи. Экстракт концентрируют при пониженном давлении для удаления этанола и обеспечения безопасности продукта.
Очистка колоночной хроматографией:Для дальнейшего разделения и очистки используйте макропористые адсорбционные смолы, такие как D101, AB-8 и NKA-II. Процесс элюирования проходит нормально, для элюирования используют 70% раствор этанола. Экстракт прозрачного цвета.
Кристаллизация:Благодаря точной концентрации растворителя и процессу охлаждения образуются светло-желтые игольчатые кристаллы дигидрокверцетина.
Гидролиз:Экстракт гидролизуют и перекристаллизовывают с получением дигидрокверцетина высокой чистоты с содержанием 95,7%-96,5%.
ВЭЖХ-хроматограммный анализ
В процессе производства весь дигидрокверцетин проверяется методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, чтобы гарантировать высокую чистоту и эффективность продукта. Как показано на рисунке, точный анализ хроматограммы ВЭЖХ показывает содержание дигидрокверцетина.
сертификат подлинностиОтчет DHQ и анализ жидкостной хроматографии
последние исследования кинтая по синтезу дигидрокверцетина
Наша исследовательская группа недавно совершила важный прорыв в изучении микробного синтеза дигидрокверцетина.
Дигидрокверцетин — важное флавоноидное соединение, которое широко используется в продуктах питания, медицине и сельском хозяйстве благодаря своей антиоксидантной, противовоспалительной, противоопухолевой и другой физиологической активности. Однако традиционные методы экстракции растений ограничены сезонами, географическими условиями и поставками сырья, что приводит к высоким производственным затратам и нестабильности производства. Поэтому использование микроорганизмов для гетерологичного синтеза дигидрокверцетина становится привлекательным вариантом.
Микробный синтез позволяет не только избежать этих узких мест при экстракции растений, но также имеет преимущества короткого производственного цикла, низких требований к окружающей среде и простоты контроля качества. Однако из-за ограничений таких факторов, как регуляция метаболизма, эффективное достижение синтеза дигидрокверцетина в микроорганизмах остается серьезной проблемой. Благодаря скринингу ключевых ферментов, инженерии промоторов, мультикопийной интеграции и метаболическому перепрограммированию мы значительно улучшили производство дигидрокверцетина и предоставили эффективный способ его промышленного производства.
Скрининг и оптимизация ключевых ферментов F3'H и F3H
Процесс синтеза дигидрокверцетина основан на катализе двух ключевых ферментов: F3'H и F3H. F3'H катализирует гидроксилирование (2S)-нарингенина в положении C-3' флавоноидного скелета с образованием (2S)-эриодиктиола; F3H превращает (2S)-нарингенин в дигидрокемпферол. Чтобы улучшить выработку дигидрокверцетина, мы проверили три F3'H и пять F3H от разных растений. После экспериментов было обнаружено, что SmF3'H и CsF3H обладают лучшими каталитическими эффектами, производя (2S)-эриодиктиол и дигидрокемпферол с выходами 254,1 мг/л и 173,4 мг/л соответственно. Поэтому мы выбрали эти два фермента для последующей оптимизации синтеза.
Оптимизация промоутерских проектов
Чтобы еще больше улучшить экспрессию SmF3'H и CsF3H, мы внедрили разработку промоторов и оптимизировали уровни экспрессии этих ключевых ферментов. Путем скрининга промоторов различной силы установлено, что при экспрессии SmF3'H и SmCPR под контролем промоторов PGAL1 и PGAL10 титр (2S)-эриодиктиола был наибольшим, достигая 382,1 мг/л. Аналогичным образом мы значительно увеличили выработку дигидрокемпферола, регулируя экспрессию CsF3H и используя промоторы различной силы, такие как PTDH1, PGAL7 и PSSA1. Эта оптимизация показывает, что за счет повышения уровня экспрессии ключевых ферментов можно эффективно повысить эффективность синтеза целевых метаболитов.
Интеграция нескольких копий повышает производительность
Чтобы еще больше улучшить производство дигидрокверцетина, мы внедрили технологию мультикопийной интеграции генов. Интегрировав копию гена пути синтеза дигидрокверцетина в мультикопийный сайт Ty2 Saccharomyces cerevisiae, мы успешно получили высокопродуктивный штамм FQ26ty, титр дигидрокверцетина которого достиг 71,4 мг/л. Количественный анализ генов показал, что число копий генов SmF3H, SmF3'H и SmCPR варьируется от 2,87 до 3,44, что указывает на то, что интеграция нескольких копий гена значительно увеличивает выработку дигидрокверцетина. Кроме того, путем дальнейшей интеграции большего количества копий генов пути синтеза мы создали серию штаммов FQE-D и успешно увеличили выработку дигидрокверцетина до 74,5 мг/л. Этот результат доказывает, что увеличение числа копий генов ключевых синтетических путей является эффективной стратегией увеличения выхода целевых продуктов.
Метаболическое перепрограммирование и оптимизация углеродного обмена.
Помимо оптимизации ключевых ферментов и интеграции генов, мы также метаболически перепрограммировали систему углеродного метаболизма Saccharomyces cerevisiae для дальнейшего увеличения производства дигидрокверцетина. Сначала мы ввели гены, связанные с путем PAL, включая AtPAL2, AtC4H, AtATR2 и ScCYB5, и полученный штамм FQ27 достиг продукции дигидрокверцетина 87,8 мг/л. Впоследствии мы дополнительно увеличили выход до 103,9 мг/л за счет сверхэкспрессии ключевых генов ARO1/2/3 шикиматного пути и гена EcAROL, полученного из E. coli. Кроме того, мы также ввели гетерологичный путь фосфокетолазы, чтобы тесно связать центральный углеродный метаболизм с синтезом эритрозо-4-фосфата, а затем получили штамм FQ29 с продукцией дигидрокверцетина 107,5 мг/л.
Оптимизация поступления НАДФН и альфа-кетоглутарата
F3'H должен потреблять НАДФН во время каталитического процесса, тогда как F3H требует -кетоглутарата в качестве ко-субстрата. Поэтому, чтобы увеличить поставку этих двух ключевых веществ, мы сверхэкспрессировали такие гены, как TYR1 и ZWF1, чтобы увеличить поставку НАДФН. Эксперименты показывают, что совместная экспрессия TYR1 и мутантного BDH1* увеличивает продукцию дигидрокверцетина на 20,2%, достигая 175,8 мг/л. Кроме того, сверхэкспрессия ARO8 дополнительно способствовала выработке -кетоглутарата, в результате чего выработка дигидрокверцетина достигала 206 мг/л. Наконец, путем сверхэкспрессии IDH1 мы получили высокопродуктивный штамм FQ38 с выходом 235,1 мг/л.
Разведка промышленно развитого производства
Основываясь на оптимизации лабораторного масштаба, мы дополнительно провели эксперименты по периодической ферментации с подпиткой в биореакторе объемом 5 л. Добавив 5 г/л CaCO3 в процессе ферментации, мы успешно увеличили титр дигидрокверцетина до 873,1 мг/л за 114 часов, установив новый рекорд производства.
Таким образом, мы значительно улучшили эффективность микробного синтеза дигидрокверцетина за счет систематической метаболической инженерии и оптимизации процесса ферментации. Это исследование не только обеспечивает техническую основу для промышленного производства дигидрокверцетина, но также дает рекомендации по микробному синтезу других вторичных метаболитов растений.
Разнообразные приложения
Диетические добавки
Функциональные продукты
Косметика
Сотрудничайте с нами для достижения успеха
В эпоху, когда здоровье и благополучие находятся в центре внимания, DHQ является лидером в стремлении к долголетию, жизненной силе и общему здоровью. Kintai, крупнейший поставщик экстрактов лиственницы DHQ в Китае, является вашим предпочтительным партнером в области высококачественных натуральных решений для достижения ваших целей в области здоровья и хорошего самочувствия.Если вы хотите приобрести качественныйЭкстракт листьев Энгельхардии Роксбургианы, пожалуйста, свяжитесь с нами по адресуsales@kintaibio.comили отзыв на следующей странице.
горячая этикетка : Экстракт листьев engelhardia roxburghiana, Китай Экстракт листьев engelhardia roxburghiana производители, поставщики, завод
